|
|
Meiotický efekt mutace genu MutS homolog 6 (Msh6) u dvou myších poddruhů
Fusek, Karel ; Forejt, Jiří (vedoucí práce) ; Reifová, Radka (oponent)
Pro účely studia hybridní sterility byl v naší laboratoři vytvořen model založený na kmeni PWD/Ph (PWD) pocházejícího z divokých myší poddruhu M. m. musculus a běžně využívaném laboratorním kmeni C57BL/6J (B6) odvozených zvíce než 90% od poddruhu M. m. domesticus. Po křížení samice PWD a samce B6 získáme samčí potomky, kteří jsou sterilní. Hybridní samci F1 generace vykazují defekty v opravě asymetrických dvouvláknových DNA zlomů (DNA double-strand breaks, DSBs) iniciovaných společným působením proteinů SPO11 a PRDM9 v meiotické profázi I, přičemž dochází k poruchám synapse mezi homologními chromozomy vedoucí k zástavě spermatogeneze a samčí sterilitě. Tvorba dvouřetězcových zlomů a jejich následná oprava je předpokladem pro první meiotické dělení. Pracovní hypotéza vychází z poznatků založených na kvasinkovém modelu, kdy předpokládaný antirekombinační mechanismus mismatch repair genů Msh6 a Msh2 zamezuje opravu DSBs v místech DNA polymorfismů mezi homologními chromozomy během meiózy. Ačkoliv není znám přesný mechanismus antirekombinační funkce těchto dvou genů, na základě homologie systému oprav napříč organismy existuje silný předpoklad podobné funkce v myší meióze. V této práci byla využita řada různých metod. Se záměrem studie účinku delece genu Msh6 na meiotickou profázi I a zrání spermií byla...
|
|
|
The role of Prdm9 in the house mouse hybrid sterility model
Mukaj, Amisa ; Parvanov, Emil (vedoucí práce) ; Děd, Lukáš (oponent) ; Reifová, Radka (oponent)
(česky) Hybridní sterilita je fenomén představující reprodukční izolaci mezi blízce příbuznými druhy a tím zajištění procesu speciace. Hybridní sterilita je komplexní polygenní znak a nejvýznamnějšího pokroku v jejím studiu je dosaženo u Drosophila melanogaster. Před téměř půlstoletím Forejt a Ivanyi zmapovali první genetický lokus hybridní sterility u obratlovců (Hybrid sterility 1, Hst1) u křížení divokých myší s laboratorními inbredními kmeny, kde je samčí potomek sterilní. Další mapování lokusu vedlo k objevu genu zvaného PR doména zinc finger protein 9 (Prdm9), histon methyltransferáza, jejíž nedostatek způsobuje meiotické zastavení a sterilitu u myší. Dále bylo zjištěno, že Prdm9 definuje umístění hotspotu v meiotické rekombinaci umístěním trimethylačních značek na lysinové zbytky 4 a 36 histonu 3, což vysvětluje pozorované defekty v jeho nepřítomnosti během meiózy. Nicméně jeho přesná role v molekulárním mechanismu hybridní sterility je zatím nejasná. Exprese Prdm9 je přítomna během fáze tvorby dvouřetězcových zlomů meiotické DNA a je náznakem doby iniciace hybridní sterility. Fenotypicky v případě hybridní sterility samců myší je pozorována neúplná chromozomová synapse, meiotická zástava ve střední až pozdní fázi pachytenu, transkripční dereprese chromozomu X, menší varlata a nedostatek...
|
|
|
Meiotický efekt mutace genu MutS homolog 6 (Msh6) u dvou myších poddruhů
Fusek, Karel ; Forejt, Jiří (vedoucí práce) ; Reifová, Radka (oponent)
Pro účely studia hybridní sterility byl v naší laboratoři vytvořen model založený na kmeni PWD/Ph (PWD) pocházejícího z divokých myší poddruhu M. m. musculus a běžně využívaném laboratorním kmeni C57BL/6J (B6) odvozených zvíce než 90% od poddruhu M. m. domesticus. Po křížení samice PWD a samce B6 získáme samčí potomky, kteří jsou sterilní. Hybridní samci F1 generace vykazují defekty v opravě asymetrických dvouvláknových DNA zlomů (DNA double-strand breaks, DSBs) iniciovaných společným působením proteinů SPO11 a PRDM9 v meiotické profázi I, přičemž dochází k poruchám synapse mezi homologními chromozomy vedoucí k zástavě spermatogeneze a samčí sterilitě. Tvorba dvouřetězcových zlomů a jejich následná oprava je předpokladem pro první meiotické dělení. Pracovní hypotéza vychází z poznatků založených na kvasinkovém modelu, kdy předpokládaný antirekombinační mechanismus mismatch repair genů Msh6 a Msh2 zamezuje opravu DSBs v místech DNA polymorfismů mezi homologními chromozomy během meiózy. Ačkoliv není znám přesný mechanismus antirekombinační funkce těchto dvou genů, na základě homologie systému oprav napříč organismy existuje silný předpoklad podobné funkce v myší meióze. V této práci byla využita řada různých metod. Se záměrem studie účinku delece genu Msh6 na meiotickou profázi I a zrání spermií byla...
|
|
|
The role of methylation of histone 3 on lysine 4 (H3K4) during mouse spermatogenesis
Blumenstein, Jan ; Trachtulec, Zdeněk (vedoucí práce) ; Král, Jiří (oponent)
Epige eti ké odifika e hro ati u hrají z ač ou roli v regula i přístup osti DNA. odifika í je etyla e histo ů. V H a lysi u ěhe sper atoge eze yši do á í a to zej é a ve Běhe eioti ké profáze I do hází k hro ozo ů, a k eioti ké reko i a i. Tyto pro esy jsou kriti ký ode tvor y pohlav í h u ěk a jeji h selhá í vede k eioti ké zástavě a tí páde k poruše tvor y haploid í h u ěk. Histo ová etyltra sferáza PRDM9 hraje klíčovou roli v eioti ké reko i a e, e oť je zodpověd á za urče í progra ova ý h dvouřetěz ový h zlo ů v íste h zva ý h hotspoty. Ni é ě ge je důležitý i ve spe ia i, a to řed i tví fe o é u hy rid í sterility. Další i protei y, které se podílí a etyla i histo u H a lysi u ěhe sper atoge eze, jsou MLL KMT D , MLL KMT E a yší h varlate h ovše az ačují, že regula i této odifika e hro ati u podílí ví e ge ů. Avšak ejsou z á é ko krét í fu k e, které ají tyto z ývají í ge y ěhe vývoje sa čí h pohlav í h u ěk. Další zkou á í tě hto ge ů ohou ýt užiteč á pro o jas ě í částeč é e o úpl é eplod os Klíčová slova: eioti ká reko i a e, dvouřetěz ové zlo y, hy rid í sterilita, sper atoge eze, etyla e histo ů
|
host ::
RSS.